استفاده از تکنیک PCR کمی برای کمیت سنجی Fusarium solani f.sp. phaseoli در لوبیا سفید حساس و مقاوم

بیماری پوسیدگی فوزاریومی ریشه لوبیا توسط بیمارگر خاکزی  f.sp. phaseoliFusarium solani  ایجاد می­شود و خسارت فراوان در مزارع لوبیا دنیا و ایران ایجاد می­کند. در حال حاضر مهمترین و اقتصادی­ ترین روش کنترل این بیماری استفاده از ارقام مقاوم می­باشد. برای این منظور در این تحقیق عکس ­العمل پنج رقم رایج کشت و 14 لاین لوبیا سفید به قارچ عامل بیماری پوسیدگی فوزاریومی ریشه لوبیا ابتدا به صورت ارزیابی مورفولوژیک و سپس کمیت­سنجی باReal time PCR  انجام شد. بر اساس نتایج ارزیابی مورفولوژیک لاین KBC43106 و رقم درسا به ترتیب حساس و متحمل شناخته شدند، سپس به منظور ارزیابی کمی و روند رشد قارچ عامل بیماری در لاین حساس و رقم متحمل گیاهچه ­های دو برگچه­ای با غلظت 107 اسپور در میلی­لیتر قارچ عامل بیماری به روش فرو بردن ریشه (Root dip) تلقیح گردیدند و در فواصل زمانی صفر،2 ، 7، 15، 21 و 30 روز پس از آلودگی از ریشه گیاهچه­ های تلقیح شده و شاهد نمونه ­برداری و استخراج DNA از آنها انجام شد. روند افزایش تدریجی میزان DNA قارچ موجود در ریشه­ ها با استفاده از تکنیک Real time PCR  و به کارگیری سیستم SYBR Green همراه با آغازگرهای اختصاصی برای ژن elongation factor 1-α کمیت­سنجی گردید. نتایج نشان داد تفاوت معنی ­داری بین مقدار DNA بیمارگر در ریشه گیاهان حساس و متحمل وجود دارد و بنابراین تکنیک Real time PCR ، تکنیک مناسبی برای ارزیابی مقاومت ارقام و لاین­های لوبیا می­باشد.